凋亡金标准直观验证!细胞凋亡 DNA Ladder 抽提试剂盒
内容概要
细胞凋亡过程中,核酸内切酶活化并切割核小体间的基因组 DNA,形成 180-200 bp 及其整倍数的 DNA 片段,琼脂糖电泳后呈现特征性的 “梯状条带(DNA Ladder)”,这是判定细胞凋亡的经典金标准形态学指标。传统酚 - 氯仿抽提法操作繁琐、有机溶剂毒性高,且易损失。亚科因生物 Abbkine 细胞凋亡 DNA Ladder 抽提试剂盒(离心柱式,货号 KTA1101)采用硅胶膜离心柱纯化技术,替代传统有机试剂抽提,可高效回收 180-200 bp 的凋亡小片段 DNA,同时保留大片段基因组 DNA,操作简便安全,样本适配类型广泛,是细胞凋亡定性验证的优选工具。
产品介绍
亚科因生物 Abbkine KTA1101 试剂盒专为凋亡 DNA Ladder 抽提优化设计,全套组分包含裂解缓冲液 A、裂解缓冲液 B、洗涤缓冲液 A、洗涤缓冲液 B、洗脱缓冲液、离心纯化柱、收集管、RNase A 以及蛋白酶 K,规格为 50 次检测,采用蓝冰冷链运输,各组分按标签提示分开存储,有效期可达 12 个月。
该试剂盒采用离心柱式纯化方案,无需使用酚、氯仿等有毒有机溶剂,实验操作更安全环保;针对凋亡细胞的片段化 DNA 优化了裂解与结合体系,可高效富集 180-200 bp 的核小体单体及多聚体 DNA 片段,同时兼容 50 kb 以上的大片段基因组 DNA 回收,提取的 DNA 纯度高,可直接用于琼脂糖凝胶电泳、PCR 等后续实验。目前该产品已被肿瘤学领域的 SCI 期刊引用,实验性能得到科研工作者的实际验证。
检测原理
细胞凋亡时,内源性核酸内切酶被激活,特异性切割核小体之间的连接区 DNA,产生长度为 180-200 bp 整倍数的寡聚核苷酸片段,即 DNA Ladder。
试剂盒首先通过裂解液裂解细胞,释放出胞内的基因组 DNA 与片段化凋亡 DNA;同时蛋白酶 K 可降解样本中的蛋白质杂质,RNase A 可去除 RNA 污染,保证核酸样本的纯度。随后将处理后的样本加入硅胶膜离心柱,在高盐缓冲液条件下,硅胶膜可特异性吸附核酸分子;通过两次洗涤步骤去除残留的盐离子、蛋白质等杂质后,用低盐洗脱缓冲液即可将纯化的 DNA 从柱上洗脱下来。
该纯化方法可有效保留小片段凋亡 DNA,避免传统乙醇沉淀法造成的小片段损失,提取的 DNA 电泳后可获得清晰的梯状条带,直观判定细胞凋亡的发生。
产品优势
其一,操作简便安全。全程无需酚 - 氯仿等有毒有机溶剂抽提,也无需耗时的异丙醇 / 乙醇沉淀步骤,离心柱法操作流程标准化,步骤简单易上手,大幅缩短实验耗时,同时避免有机溶剂对实验人员的健康危害。
其二,小片段 DNA 回收率高。针对凋亡片段化 DNA 优化了硅胶膜结合体系,对 180-200 bp 的小片段 DNA 捕获效率高,可有效富集低丰度的凋亡 DNA 片段,电泳后 Ladder 条带清晰明亮,检测灵敏度优异。
其三,样本适配类型广。可适配贴壁细胞、悬浮细胞等多种细胞样本,也可用于部分组织样本的凋亡 DNA 提取,满足不同实验设计的样本检测需求。
其四,核酸纯度高。配套蛋白酶 K 与 RNase A 可有效去除蛋白质与 RNA 杂质,提取的 DNA OD 值符合标准,无抑制剂残留,可直接用于电泳、PCR 等后续分子生物学实验,兼容性强。
应用领域
在细胞凋亡机制研究中,DNA Ladder 是判定凋亡发生的经典形态学证据,可与 Caspase 活性检测、Annexin V 流式检测等方法相互印证,从不同维度验证细胞凋亡的发生,完善凋亡机制的实验证据链。
在抗肿瘤药物筛选中,可通过提取药物处理后肿瘤细胞的 DNA,电泳观察是否出现特征性 Ladder 条带,定性验证候选化合物的凋亡诱导活性,为药物的作用机制研究提供形态学依据。
在毒理学与安全性评价中,可用于检测环境毒物、医用材料、化妆品原料对细胞的凋亡诱导作用,通过 DNA Ladder 定性评估受试物的细胞毒性与遗传毒性风险。
在细胞质量控制中,可用于干细胞、免疫细胞、细胞治疗制剂的质量检测,验证细胞制备过程中是否存在异常凋亡,保证细胞制剂的质量与活性。
总结
亚科因生物 Abbkine 细胞凋亡 DNA Ladder 抽提试剂盒(离心柱式)KTA1101 以安全便捷的离心柱纯化技术为核心,解决了传统方法操作繁琐、小片段损失大的痛点,兼具操作安全、回收率高、样本适配广的优势。无论是凋亡机制的基础研究还是药物活性筛选,该试剂盒都能高效获得清晰的 DNA Ladder 条带,为细胞凋亡判定提供直观可靠的实验证据。
