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Calmodulin Kinase II Substrate (Syntide 2);PLARTLSVGLPGKK

一、基础信息

  • 中文名称:钙调蛋白激酶 II 底物肽(Syntide 2)

  • 英文名称:Calmodulin Kinase II Substrate (Syntide 2)

  • 三字母序列:Pro-Leu-Ala-Arg-Thr-Leu-Ser-Val-Gly-Leu-Pro-Gly-Lys-Lys

  • 单字母序列:PLARTLSVGLPGKK

  • 氨基酸数量:14 aa

  • 分子式:C65H117N19O17

  • 分子量:1436.77

  • 结构修饰:线性多肽,游离 N 端氨基、游离 C 端羧基;无乙酰、酰胺、二硫键、环化、特殊修饰氨基酸;Ser 为激酶磷酸化靶位点。

  • 结构式:

二、理化性质

  1. 紫外定量:无 Tyr、Phe、Trp、Met,280 nm 无紫外吸收,需 BCA、Lowry、氨基酸分析法、茚三酮法定量。

  2. 稳定性:不含 Cys、Met,无氧化降解风险;无光敏芳香氨基酸,常规避光保存即可;序列含两处 Pro,形成刚性 β 转角,抗普通蛋白酶水解能力优于无 Pro 柔性肽。

  3. 酸碱特性:碱性残基 Arg、Lys 富集,无酸性氨基酸,整体呈强碱性;pH 6.5–7.6 激酶反应缓冲液、PBS、细胞裂解液中稳定性佳。

  4. 溶解性:Thr、亲水带电碱性残基丰富,水溶性极好,中性缓冲液常温可完全溶解。

  5. 空间构象:双 Pro 固定肽链局部转角,Ser 位点暴露于肽链外侧,是 CaMKII 特异性识别与磷酸化位点。

三、来源背景

人工设计合成的经典 CaMKII 特异性底物模拟肽,基于天然磷酸化底物保守序列改造,是钙信号、钙调蛋白激酶活性检测实验通用阳性底物。

四、生物学功能

  1. 钙 - 钙调素激活 CaMKII 后,特异性催化序列内 Ser 残基发生磷酸化。

  2. 高亲和力结合活化型 CaMKII,磷酸化效率高,是体外激酶活性检测标准底物。

  3. 仅被 CaMKII 高效修饰,对 PKA、PKC 等其他丝氨酸 / 苏氨酸激酶亲和力极低,特异性优异。

五、科研应用

  1. CaMKII 激酶活性体外检测:同位素标记、Western 磷酸化抗体、荧光定量激酶实验底物。

  2. 钙信号通路研究:神经元、心肌细胞钙信号下游 CaMKII 功能验证。

  3. 激酶抑制剂筛选:用于高通量筛选 CaMKII 特异性小分子抑制剂。

  4. 钙调蛋白 - 激酶互作机制:探究 CaM 结合对激酶底物识别能力的调控。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:pH7.2 无菌 PBS 或激酶反应缓冲液常温配制,无隔氧特殊要求。

  2. 冻干粉:短期 - 20 ℃密封避光保存;长期分装后 - 80 ℃储存。

  3. 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光可稳定存放 7–10 天。

http://www.cnnetsun.cn/news/2966390.html

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