干货：如何利用AAV精准靶向肝巨噬细胞

肝脏巨噬细胞是肝脏内一类关键的细胞组分，约占肝脏细胞总数的15%，在维持体内平衡、促进和消退炎症、修复组织以及导致纤维化进展或消退等方面的发挥关键作用。肝脏受损时，常驻的Kupffer细胞会感知到稳态被打破，随即与肝内其他细胞群相互作用，释放趋化因子，招募血液中的白细胞（包括单核细胞）；这些单核细胞进入肝脏后，便分化为单核细胞来源的巨噬细胞（MoMϕs）。随着对肝脏巨噬细胞异质性和功能多样性的深入了解，以其为靶点的疗法有望成为未来治疗肝脏疾病的一种有前景的选择。基于此，选择一种精准高效靶向肝巨噬细胞的基因递送方式就显得尤为重要。

AAV8血清型+CD68或F4/80启动子

AAV8血清型在肝脏基因递送中有广泛的应用。CD68是一种高度糖基化的糖蛋白，在巨噬细胞和其他单核吞噬细胞中高表达，因此CD68启动子常被用作巨噬细胞特异性启动子。F4/80也是一种鼠巨噬细胞的标志物。

代谢功能障碍相关性脂肪肝（MAFLD）是一种复杂的、多因素的代谢性疾病。肝磷酸甘油酸脱氢酶（PHGDH）是丝氨酸生物合成途径的限速酶，已知其参与调节先天性和适应性免疫，也参与调控MAFLD的发生发展。虽然巨噬细胞在与MAFLD相关的炎症反应和免疫失调中的关键作用已得到充分证实，然而巨噬细胞PHGDH在MAFLD进展中的作用机制尚不明确。

经验分享

天津医科大学总医院与四川省人民医院的科研团队发现，脂毒性诱导剂棕榈酸（PA）可显著增加巨噬细胞PHGDH的表达，而巨噬细胞PHGDH的缺乏会促进PA诱导的炎症反应，髓系细胞特异性PHGDH缺乏会加重小鼠的MAFLD病情。研究人员利用和元构建的AAV8血清型配合CD68启动子，介导肝巨噬细胞中PHGDH过表达。结果显示，EGFP与其他肝细胞标记物（例如肝窦内皮细胞标记物SE-1、星状细胞标记物α-SMA 和肝细胞标记物AFP）均无共定位，说明AAV有效靶向肝巨噬细胞；此外，肝巨噬细胞中PHGDH过表达显著减轻了高脂高胆固醇（HFHC）饮食喂养小鼠的MASH进展。

图1 AAV8血清型配合CD68启动子不会靶向肝窦内皮细胞、肝星状细胞和肝细胞

（Penghui Hu, et al.,Cell Reports, 2025）

图2 AAV介导的肝巨噬细胞中PHGDH的过表达可减轻HFHC饮食诱导的MASH进展

（Penghui Hu, et al.,Cell Reports, 2025）