SPY650-FastAct：用于活细胞快速肌动蛋白动力学成像的远红探针

一、产品概述

SPY650-FastAct 是一种荧光发生型远红探针，专用于活细胞中快速肌动蛋白动态过程的可视化。该探针由 SPY 染料与化学修饰的天然产物茉莉内酯（jasplakinolide）偶联而成。茉莉内酯是已知的肌动蛋白结合化合物，经化学优化后，该探针能够以高特异性和低背景对活细胞中的 F-肌动蛋白进行标记，同时支持快速动态过程的实时成像。

二、核心应用场景

活细胞中快速肌动蛋白动态的可视化：适用于观察肌动蛋白丝的快速组装、解聚及重塑过程。

稳定肌动蛋白丝的可视化：也可用于标记相对稳定的肌动蛋白结构。

多色成像兼容：其远红发射光谱为与其他颜色荧光标记（如绿色、黄色）联合使用提供了便利，便于开展多参数细胞成像实验。

三、材料构成与工作原理

由艾美捷代理，Cytoskeleton推出的SPY650-FastAct 探针（货号：CY-SC505）由两部分功能单元组成：

SPY 染料：提供荧光信号，且具有荧光发生特性——仅在结合 F-肌动蛋白时荧光显著增强，未结合状态下荧光极弱，从而有效降低背景。

化学修饰的茉莉内酯：作为肌动蛋白结合元件，赋予探针对 F-肌动蛋白的高亲和力和特异性。

这种设计使得探针能够快速结合至肌动蛋白丝，并以高时空分辨率捕捉肌动蛋白的动态行为。

四、关键特性

特性 | 描述

激发/发射波长 | Ex: 652 nm, Em: 674 nm（远红光谱区）

细胞通透性 | 可穿透活细胞膜，无需透化处理

适用样本 | 活细胞（不适用于固定细胞）

荧光发生特性 | 结合 F-肌动蛋白后荧光增强，背景极低

成像兼容性 | 支持宽场、共聚焦、SIM（结构光照明显微镜）、STED（受激发射损耗显微镜）

生物活性验证 | 在活 HeLa 细胞中验证了标记肌动蛋白丝及快速动态的能力

五、生物活性测定方法

CY-SC505 探针的生物活性通过其在活 HeLa 细胞培养物中有效标记肌动蛋白丝和捕捉快速肌动蛋白动态的能力进行评估。具体操作建议如下：

1. 快速动态成像：不建议进行洗涤步骤。洗涤会移除未结合的探针，但可能干扰对快速动态过程的连续记录。为捕捉肌动蛋白的瞬时变化，应保持探针存在于成像培养基中。

2. 长时间延时成像：若需要进行数小时以上的时间序列采集，同样建议不进行洗涤，将探针持续保留在成像培养基中，以维持稳定的标记信号和动态过程的完整记录。

六、使用注意事项

该探针专门设计用于活细胞，不推荐用于固定样本。

由于探针的荧光发生特性，无需额外洗涤即可获得高信噪比图像，尤其适合追踪肌动蛋白的快速重构事件（如细胞运动、分裂、吞噬等）。

远红光谱（652/674 nm）可减少对细胞的光毒性，并降低自发荧光干扰，适用于长时间成像实验。